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色谱柱受到污染该的应对方法

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时间:2020-05-27 15:03:17

色谱柱受到污染该的应对方法


色谱柱在日常运用过程中,虽然维护严格,样品和活动相虽然经过前处理,但经过长时间的运用,依然难以完全避免柱子受到污染,固定相丢失、板结、柱床陷落以及柱效下降等。有些能够经过维修,使部分柱效康复。

 

1.柱污染再生技术 

色谱柱污染后,能够用适宜的溶剂冲刷,使柱效再生。C18柱惯例的再生洗涤办法是:分别用甲醇、三氯甲烷、甲醇/水各60 mL顺次经过色谱柱,再用100%甲醇60 mL平衡色谱柱后封存,柱效将康复正常。必要时,根据柱污染性质(如有机污染、盐类污染等),选用0.05 mol/L H2SO4、0.5 mol/L H3PO4或0.1 mol/L EDTA钠盐冲刷,然后再用水冲刷,后用100%甲醇平衡色谱柱后封存。关于严峻污染的C18柱,可选用水、甲醇、氯仿、乙烷顺次冲刷后,按顺序倒过来再冲刷1次,每次所用溶剂60 mL,不接检测器,后用100%甲醇平衡色谱柱封存。

 

2.柱污染的修正 

在柱污染再生无效或已知柱污染严峻时,能够选用柱修补的办法解决,但柱污染深度不宜超过5 mm。办法是将特制小铲将污染部分挖去,再用与柱填料相同的固定相与活动相混合制成浆状,然后将浆状固定相细心补入被挖去的部分(尽量使后添补的固定相挨近原装的紧密程度),修平端面即可。修好的柱子如果柱头两头的筛板的孔径是共同的,可将柱子倒置过来运用一般时间,意图是借助活动相冲刷作用,康复柱床紧密程度。

 

3.柱陷落的修正 

柱陷落的原因很多。关于陷落不太严峻时,如果柱头两头的筛板孔径是共同的,可将柱倒置运用一般时间,即可康复性能。当陷落严峻(5 mm左右)时,可选用柱污染的修正办法修补即可。




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