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赛默飞世尔三大氨基柱色谱柱的区别及维护

浏览次数:8721
时间:2020-04-21 10:14:09

无论气相仍是液相,色谱柱都是别离的核心。液相色谱柱的固定相可以说是形形色色,有C18,C8,C4,苯基柱,氰基柱,氨基柱等等。色谱柱运用的好坏,直接关系到剖析别离的结果,咱们都知道氨基柱有运用寿命短等问题,今日在这里给咱们带来氨基柱的运用保护攻略,希望通过更好的保护运用,让咱们手中的色谱柱发挥出更大的效果。


说起氨基柱,咱们了解的是拿它来做糖的剖析。这是一个典型的HILIC形式。除了HILIC形式以外,氨基柱还可以用做正相和弱阴离子交流两种形式。可以说应用范围和形式非常广。


ThermoFisher色谱柱系列咱们族中拥有三款氨基键合相的色谱柱,分别是Hypersil GOLD Amino、Syncronis Amino和Hypersil APS-2。有人会问,都是氨基柱,他们的差异又在哪里呢?


让小编来给咱们逐个做个介绍。Hypersil Gold Amino这款氨基柱具有更对称的峰型,在生产工艺上有更致密的键合技能,硅胶表面残存的硅醇基数量低。Syncronis Amino这款氨基柱金属杂质含量在同类色谱柱中低,可以带来更高的柱效,而Hypersil APS-2这款氨基柱在别离多组分化合物时更具优势,并且在美国药典和欧洲药典中多有应用。说了这么多咱们看看下面该怎么运用保护。


 

保存液

(Gold Amino和Syncronis Amino)出厂保存液为乙醇,APS-2柱出厂保存液为:异辛烷:乙醇:水=85:14.7:0.3,新色谱柱假如运用反相活动相条件,请充沛置换色谱柱内正相溶剂。

活化

新色谱柱假如运用HILIC形式,运用前请运用异丙醇小流速过夜平衡色谱柱。流速主张0.1mL/min,之后再转换到100%乙腈冲刷20柱体积,然后转换到和活动相相同比例的不含盐的乙腈水系统冲刷20柱体积。

冲刷

用乙腈:水=60:40条件对色谱柱进行清洗,清洗时,不主张水相比例超越40%,过高运用水相容易导致键合相水解。

色谱柱再生

当色谱柱通过长期运用,柱效很低时,可以对色谱柱再生处理,用乙腈:水(水中参加0.05%氨水)=60:40条件冲刷30柱体积。



保存

一个月以内的保存,请运用与所选用活动相组成相同的有机溶剂和水的混合溶液(不含酸、无机盐)进行置换,请避免只用水进行置换;一个月以上的长期保存,在进行了上述处理之后,请用乙腈置换并保存。


氨基柱糖类的分析

1、请设定乙腈/水的活动相条件。乙腈的浓度越高,则对糖的保存才能越强。

2、若选用含甲醇或缓冲盐的活动相,峰会展宽。

3、若将糖的水溶液作为样品注入,谱峰会展宽。请运用含乙腈50%以上的溶剂来制造糖类样品。

4、曾在酸性条件下运用过的色谱柱,糖类剖析的保存时间、峰形会发生变化。


离子型物质的分析

1、请设定乙腈/磷酸缓冲液且具有必定pH值的活动相条件。

2、调查活动相条件时,按照pH由高到低的次序进行调查。假如曾经在低pH下运用,填料的表面将无法回到初始状况。

3、有时需要长期平衡色谱柱(24小时以上)。平衡所需时间与通液量和盐浓度严密相关,因而,时间紧迫时请提高流速,或pH不变而增加活动相的盐浓度来进行平衡。




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