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液相色谱仪冲洗是正常工作的保障

浏览次数:6458
时间:2019-12-05 10:50:45

运用液相色谱仪HPLC体系杰出运行的第三个关键是坚持体系的清洁。你需求重视活动相流经该体系的一切当地,关于这些当地经常性的冲刷,将使你的体系坚持在“Ready”状态。


1、活动相储液瓶

首先要经常清洗活动相储液瓶,或者每做一批新样品替换一次活动相。一个脏的储液瓶将会污染注入的活动相。主张储液瓶中缓冲液运用时刻不要超过一周,而有机溶剂运用时刻不要超过一个月。也有人主张储液瓶中坚持用溶剂充溢,直到替换剖析方法储液瓶需替换新溶剂(活动相组成发生变化)时,将旧溶剂倒掉替换新溶剂,这样胜于将溶剂用完。但这关于剖析样品量少的实验室而言似乎有些糟蹋。仪器公司的工程师主张储水瓶的水要天天换,每周瓶子还应该用异丙醇清洗一次。有的实验室则在水里加入0.1~1 mM的甲酸抑制微生物的成长。这些做法看起来有些繁琐,但却能起到“磨刀不误砍柴工”作用。


液相色谱仪冲洗是正常工作的保障


2、泵

接下来要冲刷的是泵。千万不要一剖析完冲几分钟后就停泵,特别是当活动相中含有难蒸发的缓冲液(如磷酸盐)时。假如仪器不是连续运用,当活动相蒸发时,难蒸发物就会粘在活塞密封垫的外表,难蒸发物将构成固形物堆积。这是泵密封垫磨损和单向阀渗漏的主要原因之一。所以,无论运用长短,在停泵以前一定要用非缓冲液活动相冲刷泵在半个小时以上,要是活动相中有难蒸发缓冲盐则主张冲刷的时刻应该更长些。


3、自动进样器

自动进样器也要按规则清洗。现在的仪器多配有自动进样器的冲刷液瓶,一般只需注意及时替换、弥补冲刷液即可。自动进样器用的洗涤液也要采用与活动相相同的方式处理,并根据溶剂的有用期和规则,清洗储液瓶或替换洗涤液。现在的自动进样器设置、操作都很简单,假如时刻允许(特别是利用夜间运行),每次剖析完后设置进1、2针纯溶剂(如甲醇、乙腈),也是一个好做法。


4、色谱柱 

对色谱柱的污染是随运用时刻而增加。一般表现是:运行走基线时在记载的色谱图中基线噪音增加,泵压也增加。解决这个问题的zui有用方法就是在每一批样品剖析完毕后或预备卸下柱子时用大量的活动相冲刷柱子(例如,甲醇、乙腈和水)。用梯度冲刷作用更好,具体的份额要根据柱子的说明书和性质而定。


5、检测器

假如是正常运用,检测器将根据其性质并按照说明书规则进行洗。例如UV/VIS检测器或FL检测器,在对柱子和体系进行冲刷时也就一同对检测器流通池中污染物进行了清洗。可是蒸发光检测器或质谱仪则需求按照说明书进行定时清洗。这些检测器在运用时会有难蒸发污染物堆积,如质谱仪离子源的喷针、毛细管、锥孔板、预四极等部件,因此需求定时清洗。并且对联有这些检测器的体系冲刷时,zui好与这些检测器断开,以减少对检测器的污染。


总归,实验室日常运用的液相色谱仪要是能认真做好这三项工作——脱气、过滤和冲刷,你的仪器可以得到杰出的预防性维护,运用时就会感到比较顺手。当然,在实际操作时遇到的问题并没有这么简单,但这三个杰出习惯将是正确操作、运用HPLC体系的基础。




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