凝胶色谱仪洗脱次序和分配系数K

凝胶色谱仪是使用大小不同的分子在多孔固定相（凝胶）中的选择性浸透来分离的，适用于分离分子量不同的大分子物质（Mr＞2000）。

一、洗脱次序：

凝胶色谱中组分与凝胶之间无作用力，仅仅根据分子量大小来分离。凝胶是有一定孔径散布范围的多孔物质，组分进入色谱柱后，向凝胶的孔中分散，保存程度取决于孔和组分分子的大小。小分子悉数渗入小孔中，在流经色谱柱时阅历的旅程zui长。大分子彻底被排挤在孔外，阅历的旅程zui短。中等大小分子渗入部分较大的孔，而被较小的孔排挤，阅历的旅程居中。故洗脱次序是组分分子大小（分子量）的函数。

二、分配系数K：

        组分进入色谱柱，从高浓度的流动相向凝胶的孔中分散，分散平衡时：

        小分子一半在孔内，一半在孔外，K = 1。

        大分子（直径大于凝胶孔径），被悉数排挤在凝胶孔隙外，K = 0。

        中等大小分子的直径介于以上两种极限之间，0＜K＜1。

        故在凝胶色谱中，0≤K≤1。

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